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T4 RNA连接酶I图片
产品货号:
WH0163
中文名称:
T4 RNA连接酶I
英文名称:
T4 RNA Ligase 1
产品规格:
1.5kU|10kU
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
T4 RNA Ligase I是ATP依赖型的单链核酸分子(RNA或DNA)连接酶。连接效率受供体和受体各自的碱基影响。DNA与RNA之间的连接效率较RNA之间的连接效率低,DNA之间的连接效率最低。本产品来源于含有T4噬菌体RNA连接酶基因表达质粒的大肠杆菌菌株。该酶分子量约为43.5kDa。本制品浓度为20U/μl。

产品特点:
·催化单链RNA分子之间的高效率连接;
·蛋白比活性高,稳定性好。

产品组成:
组分WH0163-1WH0163-2
T4 RNA Ligase I1500U10000U
10×T4 RNA Ligase1 Buffer250μl1.5ml

储存条件:-25℃~-15℃保存。

贮存液成分:10mM Tris-HCl,50mM KCl,0.1μM ATP,0.1mM EDTA,1mM DTT,50%甘油。

适用范围:
1.在二代测序(NGS)应用中,主要用于miRNA文库构建中的5'端接头的连接。
2.单链RNA分子之间的连接。

单位定义:
在1×T4 RNA Ligase Buffer反应液中,37℃、30min内使0.4μg等摩尔比23nt单链RNA寡核苷酸的两条单链(其中一条5'端磷酸化修饰)连接50%时,所需要的酶量定义为1个活性单位(U)

质量控制:
性质描述
蛋白纯度蛋白纯度>99%
酶活性16,800U/mg
单链核酸外切酶200 U酶中,<5.0%
双链核酸外切酶200 U酶中,<1.0%
双链核酸内切酶200 U酶中,未检出
宿主基因组污染200 U酶中,<10拷贝
非特异性RNase残留200 U酶中,未检出


使用方法:
1.在NGS文库构建过程中,一般按终浓度1U/μl的量加入T4 RNA连接酶1。也可根据实验具体情况来调整用量。
2.在其他应用中的使用例如下:
成分用量
Single-stranded RNA or DNA1~2 μg
10×T4 RNA Ligase1 Buffer5μl
T4 RNA Ligase I(20U/μl)40~50 U
0.1%BSA3 μl
PEG600025%
ddH2O至50 μl

反应条件:在5~16℃下反应16~18小时;加入2 μl的0.5M EDTA终止反应。
相关搜索:T4 RNA连接酶IT4 RNA Ligase 1
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